CONVOCATORIA:   2016

ENTIDAD FINANCIADORA:   INSTITUTO DE SALUD CARLOS III

INVESTIGADOR PRINCIPAL:    ALBERTO ORFAO DE MATOS

DOTACIÓN:  175.250,00 euros

REFERENCIA:   PI16/00787

TÍTULO:   DISEÑO, EVALUACIÓN TÉCNICA Y VALIDACIÓN CLÍNICA DE UN MÉTODO DE NUEVA GENERACIÓN PARA MONITORIZACIÓN DE ENFERMEDAD MÍNIMA RESIDUAL EN MÉDULA ÓSEA Y SANGRE EN LEUCEMIAS AGUDAS

RESUMEN: 

Se desarrollarán dos métodos estandarizados de alta sensibilidad para la detección de enfermedad mínima residual (EMR) en médula ósea (MO) y sangre periférica (SP) mediante citometría de nueva generación (NGF), aplicables a la (práctica) totalidad de los pacientes con LAM y LAL e independientes del tratamiento administrado. En esta primera fase nos centramos en identificar nuevos biomarcadores, desarrollar paneles de biomarcadores y herramientas informáticas integrados en dos métodos NGF de >12 fluorescencias, para la detección (automatizable vía software) de EMR en MO y SP de LAM y LAL de precursores B (LAL-pB), dirigida esta última tanto a los compartimentos de precursores B CD19+ como CD19-. En una segunda etapa, validaremos la aplicabilidad, especificidad y sensibilidad de ambos métodos.

Durante la primera anualidad del proyecto se ha recopilado y analizado retrospectivamente (Tarea 1) más de la mitad de las muestras de MO y SP del grupo control (160/200), habiendo superado ampliamente el número de muestras recopiladas de pacientes con LAL-pB y LMA estimadas inicialmente (3123 muestras procesadas vs. 1400 estimadas). Para su análisis, se han empleado y comparado estrategias convencionales y automatizadas con el objeto de perfeccionar los algoritmos asociados a estas últimas (Tarea 4), para su posterior aplicación a los paneles a diseñar y validar en fases posteriores del proyecto. En este sentido, se ha elaborado una extensa lista de marcadores candidatos (>100) para los nuevos paneles de EMR en LAM y LAL-pB (Tarea 2), de entre los que han sido seleccionados aquellos clones disponibles comercialmente que proporcionan marcajes óptimos en sus respectivos fluorocromos; además se han generado y testado 3 nuevos clones dirigidos frente a epítopos de CD19 distintos de los empleados hasta la fecha en tratamientos con anticuerpos monoclonales y CARs. Estos marcadores, se están evaluando ya en sus correspondientes combinaciones (≥12 fluorescencias; Tarea 3), junto con un set de marcadores comunes ("backbone") basado en una optimización del backbone previamente validado por EuroFlow para la identificación de la diferenciación temprana de todas las líneas celulares mieloides y de línea linfoide B (combinaciones 1-7). Estas nuevas combinaciones seránevaluadas a lo largo de la segunda anualidad.

En conclusión, a falta de completar el grupo control, podemos comenzar con la segunda etapa de validación de los paneles y algoritmos informáticos desarrollados/optimizados hasta el momento, habiendo completado las distintas tareas propuestas para esta primera anualidad

del proyecto.

ESTE PROYECTO ESTÁ COFINANCIADO POR EL FONDO EUROPEO DE DESARROLLO REGIONAL (FEDER). “Una manera de hacer Europa”